¿Cómo se forma ADN recombinante

? ADN recombinante es el producto de la combinación de ADN de dos organismos diferentes . Las enzimas de restricción son enzimas bacterianas que catalizan la escisión de la molécula de ADN y se utilizan comúnmente en el proceso de hacer de ADN recombinante . ADN de un organismo se introduce en el genoma de otro organismo , resultando en un genoma recombinante que exprese proteínas de ambos organismos . La transformación bacteriana se utiliza a menudo en la producción de ADN recombinante . El proceso consiste en cuatro pasos clave . Aislamiento de ADN
ADN debe estar aislado del donante y el vector .

El primer paso es aislar vector y ADN del donante . Si el donante es una bacteria , se aisló el ADN genómico principal . Si se trata de un eucariota , se aisló el ADN nuclear. El ADN del vector es comúnmente un plásmido bacteriano . Los plásmidos se deben separar a partir de ADN genómico bacteriano; esto se hace comúnmente por centrifugación.
ADN corte
Las enzimas de restricción se utilizan para cortar el ADN en fragmentos.

Las enzimas de restricción son producidas por bacterias para proteger contra la infección por virus. Estas enzimas actúan como tijeras , cortando el ADN en secuencias de nucleótidos diana . Las enzimas de restricción de ADN cortado en fragmentos suficientemente pequeños para ser utilizados en la clonación con extremos pegajosos que permiten la unión de el vector y el ADN de los donantes .
De unión de ADN
El ADN del vector y ADN donante se unen mediante la mezcla .

El donante y el ADN del vector se combinan . Una enzima ligasa de ADN se unirá los extremos pegajosos de la donante y el vector de ADN mediante la creación de enlaces fosfodiéster entre las columnas vertebrales de fosfato de los dos tipos de ADN .
ADN recombinante Amplificador
ADN recombinante moléculas a veces se replican en un huésped bacteriano .

el vector plásmido que contiene el ADN del donante puede entrar en una célula bacteriana a través de simple transformación . Transformación se produce cuando una célula bacteriana ocupa ADN del entorno y lo incorpora en el genoma huésped . Entonces , el vector , junto con el ADN del donante , se replicará por la célula bacteriana junto con su genoma . De esta manera, se amplifica el ADN recombinante.