Cómo traducir ARNm en proteínas

Nuestros genes codifican proteínas que se utilizan en nuestras células para llevar a cabo funciones tales como el metabolismo de la energía , la biosíntesis y la división celular . Las proteínas se construyen a partir de aminoácidos unidos por enlaces peptídicos . " Traducción " es un proceso por el cual un ácido ribonucleico mensajero (ARNm ) , que es básicamente una copia de su gen individual , se utiliza como plantilla para construir una proteína . En la naturaleza, la traducción de proteínas que ocurre dentro de una célula viva , pero los biólogos moleculares han aprendido cómo hacer las proteínas en el laboratorio. Esta técnica se utiliza para la identificación rápida de productos de genes , estudios de plegamiento de proteínas , estudios de mutación , y studies.Things funcionales que necesitará : su ARNm Rabbit sistema de lisado de reticulocitos
aminoácidos Mezcla menos Metionina
mezcla de aminoácidos leucina minus
RNasin
Transcend ARNt
Pipetas y puntas
Microcentrifuge tubo
Mostrar Más instrucciones Matemáticas 1

Combine todos sus componentes en un tubo de microcentrífuga : Pipetear 35 microlitros de lisado de reticulocitos de conejo sistema , 0,5 microlitros de las mezclas de aminoácidos , 1 microlitro de RNasin , 2 microlitros de ARNm y 1 microlitro de ARNt juntos , y mezclar . El Sistema de reticulocitos lisado de conejo incluye todas las moléculas que se encuentran en el interior de nuestras células y requieren para su traducción , incluidos los ribosomas y factores de iniciación . Este paso será preparar todo listo para la traducción . Su molécula de ARNm se une a un ribosoma , y los factores de iniciación de montar . Las moléculas llamadas ARNt se asocian con sus aminoácidos y están listos para construir la proteína.
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Calentar la mezcla de reacción a 30 grados Celsius. La traducción se iniciará durante este paso . El mensaje en el ARNm es " leído " por los tRNAs . Cada ARNt lleva un aminoácido, y estos aminoácidos se unen entre sí para formar la proteína .
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esperar 90 minutos para que la traducción para proceder. Los ARNt siguen llevando nuevos aminoácidos de acuerdo con el mensaje de ARNm . Una vez que el ARNm es totalmente leer , la traducción termina y la proteína está lista.
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purificar su proteína por SDS -PAGE. Está listo para las pruebas funcionales.