Las propiedades de Taq Polimerasa

Taq polimerasa , una enzima más comúnmente usado en la reacción en cadena de la polimerasa ( PCR) , se aísla de Thermus aquaticus . Estos microorganismos THERMOPHILLIC viven en fuentes termales a temperaturas de 70 a 73 grados C. La Taq polimerasa utilizada hoy está aislado de la cepa YT- 1 , una cultura de T. aquaticus recoge de seta de la primavera , una gran primavera en la cuenca inferior del géiser . Propiedades a la Venta

integral Taq polimerasa tiene 832 aminoácidos y un peso molecular de 94.000 daltons. Tiene una actividad específica de 292.000 unidades , con cada unidad de adición 10 nmoles de desoxirribonucleótido trifosfato ( dNTPs ) en un producto en 30 minutos . Taq era la primera polimerasa encontrado para retener su actividad después de la exposición a alta temperatura . Más específicamente , Taq polimerasa tiene una actividad media de vida de 45 a 50 minutos a 95 grados C y de 9 minutos a 97,5 grados C.
Actividad

La óptima actividad de polimerización de la Taq es a temperaturas de 80 grados C , en presencia de KCl 55 mM y 2 mM de MgCl2 y un pH de 9,4 .
Aplicación

el factor más importante que contribuye a la popularidad de la Taq polimerasa en la PCR es su capacidad para funcionar en y soportar una temperatura alta . Esta propiedad hace que sea ideal para la PCR , lo que requiere una alta temperatura para desnaturalizar el ADN de doble cadena . Una PCR se compone de un máximo de 40 ciclos , y la temperatura de cada ciclo varía de aproximadamente 50 a 95 grados C. Escherichia coli (E. coli ) ADN polimerasa , utilizada para la PCR antes de la aislamiento de Taq , fue destruida por la elevada temperatura y tuvo que ser repuesto después de cada etapa de desnaturalización . Este aumento de la tasa de error y las posibilidades de contaminación cruzada en la PCR. El uso de Taq polimerasa en la PCR no sólo ha simplificado la técnica , sino también la mejora de su especificidad , el rendimiento y la sensibilidad. Debido a su amplio uso e importancia en el campo de la biología molecular , la revista "Science" llamada Taq polimerasa " molécula del año " en 1989.
Limitación

la capacidad de corrección de pruebas exonucleasa es ausente en Taq polimerasa. Esto significa que Taq tiene baja fidelidad de replicación, ya que no puede corregir los errores que se puedan producir durante la amplificación . Estos errores limitan el uso de Taq polimerasa , donde se requiere una alta precisión.