Método de torunda para la recuperación de Coliformes

El método de hisopo se puede utilizar para recuperar coliformes ( en forma de varilla , gramo, no de esporas de bacterias negativas forman que pueden producir gas cuando la fermentación de la lactosa ) . Presencia de coliformes es un buen indicador de bacterias patógenas dentro de una muestra . Tienen una duración de un poco más de tiempo en las muestras tanto sólidas como líquidas que las bacterias patógenas y pueden ser identificados fácilmente por sus características. Ellos son por lo general sólo se encuentran en el tracto intestinal de humanos y animales , no en los alimentos , el suelo o el agua. Uno de los más conocidos es coliformes E. coli.There son tres pruebas para determinar el recuento de coliformes : presuntivos , confirmados , y completó . Recopilación de Coliformes Posibles
hisopos estériles pueden ser usadas para obtener posibles coliformes en muestras sólidas, tales como los alimentos.

Para muestras más sólidas , como los alimentos , hisopos son una buena herramienta para la recuperación de los coliformes en la muestra . El hisopo se puede insertar en la muestra de alimento directamente o la muestra puede ser molido antes de limpiando . Para la prueba de presunción , el hisopo se coloca entonces en un tubo que contiene caldo de lactosa y un tubo de Durham . Por lo general, esta prueba se realizó por triplicado , es decir, tres hisopos se utilizarán en la muestra y se colocaron en tubos individuales . Para la prueba de líquidos , pipetear una cierta cantidad de la muestra en el tubo se prefirió el método de hisopo.
Presunta Prueba

La prueba presuntiva busca la presencia de gas en el tubo . A medida que los posibles coliformes descomponen , el gas de la lactosa se emite en forma de un producto - y que está atrapado en el interior del tubo de Durham. Ausencia de gas indica que no hay coliformes presentes en la muestra ensayada . Un resultado positivo sería burbujas de gas después de 24 horas de incubación; si las burbujas de gas sólo se ven después de 48 horas , esto se considera un resultado positivo dudoso . El gas no puede ser debido a los coliformes y se necesitan pruebas adicionales .
Confirmado
En una placa de EMB , el crecimiento bacteriano verde brillante es un fuerte indicador de E. coli .

Una placa eosina azul de metileno (EMB ) es surcado de los aspectos positivos y los caldos positivos dudosos de la prueba presuntiva . Una placa EMB negativo tendrá colonias de color rosa y puede indicar que el gas se ve en la prueba de presunción no se debió a coliformes , pero otros tipos de bacterias . Una placa EMB positivo tendrá colonias verdes púrpuras o brillante; esto confirma que los coliformes pueden estar en la muestra .
Completado

colonias de la placa de EMB positiva se seleccionaron y se desarrollaron en caldo de lactosa , así como en un tubo inclinado de agar nutriente . La prueba Completado doublechecks los resultados de los caldos de lactosa anteriores. Después de una incubación de 24 horas , las bacterias de la inclinado de agar nutriente se tiñeron utilizando la tinción de Gram . Si las bacterias son Gram - que será de color rosa; si son Gram + que aparecerán de color púrpura. Si los organismos presentes son Gram - , tienen forma de bastón cuando se observa con un microscopio, y también produjo el gas en el caldo de lactosa, a continuación, la recuperación de coliformes fue exitosa

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