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Los deméritos del Método Count PlateEn el método de recuento en placa , un cultivo microbiano se introduce en un medio nutriente. Después de un período de incubación, cada célula microbiana se divide para formar una colonia visible como una zona pequeña . Estas células se denominan unidades formadoras de colonias (UFC) y un recuento de estas zonas proporciona información acerca de la carga microbiana de la muestra . Aunque este método es valioso porque determina sólo el número de organismos viables , también tiene algunas desventajas . Necesidad de Pretratamiento Si la placa directamente un cultivo bacteriano , el número de células que crecen en la placa son demasiado grandes para permitir el recuento . Por lo tanto , es importante utilizar un proceso de dilución en serie para asegurar que el número de colonias en la placa es de alrededor de 300 a 500. En algunos casos , tales como muestras de agua altamente purificada , puede haber muy pocos organismos en la muestra . Tales muestras deben concentrarse antes de que se pueden sembrar para el recuento . La placa proporciona un medio nutriente para el crecimiento de microorganismos con rayas en él . Por consiguiente, todos los organismos reciben los mismos nutrientes. Si bien esto está muy bien para las culturas que constan de un solo organismo, que plantea un problema en el caso de cultivos mixtos . Los diferentes organismos presentes en un cultivo mixto pueden diferir cuantitativamente y cualitativamente en sus requerimientos nutricionales. Cuando esa cultura crece , las células que no reciben una alimentación suficiente no crecen y se multiplican . Por lo tanto , aunque los organismos están presentes en la cultura, sus cifras no reflejan en el recuento en placa . La precisión del recuento en placa depende de una distribución uniforme de los organismos en la superficie de la placa de agar . Si estas células se distribuyen de forma desigual en la superficie , que provoca errores en el recuento obtenido . Por ejemplo , en algunas especies , los organismos pueden producirse células no como individuales , sino como clusters, pares , o paquetes . Por lo tanto , la hipótesis de la concentración de gérmenes que cada colonia ha surgido a partir de una sola célula es errónea y la población estimada de los organismos es mucho menos que los niveles de confianza . Antes de chapado , la cultura se representa suficientemente diluida para permitir el aislamiento de células separadas en la placa . Un error en este proceso de dilución tiene un impacto importante en el recuento final de placa viable. La temperatura y tiempo de incubación también son factores críticos porque los organismos difieren en su temperatura de incubación óptima y período . En el caso de cultivos mixtos , donde hay una gran diferencia en estos valores a través de los organismos , no puede haber un crecimiento insuficiente de una especie en particular , dando lugar a un error. Después de sembrar el cultivo, las placas de agar se incuban para permitir que las colonias se desarrollen. Este período de incubación puede variar desde días a semanas, dependiendo de la naturaleza de los organismos . En ciertos casos , los resultados obtenidos al final de este periodo pueden ser de ningún valor práctico . Por ejemplo, utilizando el conteo de placas para el seguimiento del medio ambiente en una unidad de fabricación parenteral estéril no tiene beneficios en tiempo real a pesar de que tiene un valor en el seguimiento de las tendencias en la carga microbiana de la zona. Anterior: Siguiente: colegio
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