¿Qué hace Acetona Alcohol a una tinción de Gram

? La tinción de Gram es un procedimiento de tinción diferencial que muestra que las bacterias son Gram -positivas y Gram -negativas en base a su color de la mancha . Alcohol acetona es un reactivo utilizado en este proceso para proporcionar la diferenciación de color . Bacterias Gram-positivas tienen una capa de peptidoglicano de espesor y mancha púrpura, mientras que los microorganismos Gram- negativas tienen un poco o nada de la capa de peptidoglicano y la mancha de color rosa. Primaria a las manchas violeta cristal

Una vez que se prepara un portaobjetos de muestra bacteriana , violeta cristal se utiliza para teñir la muestra primero . En este punto bacterias tanto Gram - positivas y Gram - negativas aparecerán de color púrpura. Por lo general, el cristal violeta se aplica sobre el portaobjetos durante 30 segundos antes de lavar el exceso de mancha con agua . El cristal violeta se puede adherir un poco a las capas de peptidoglicano por lo que no toda la mancha principal se lava con el agua. Luego se añade
mordiente - Yodo

Yodo a la muestra durante un minuto . Actúa como un mordiente , que sirve para fijar colorantes en un proceso de tinción . El yodo realiza esta función mediante la unión a la violeta de cristal y la creación de un complejo insoluble que se adhiere mucho mejor a la capa de peptidoglicano de espesor que se encuentra en las células bacterianas gram - positiva que el solo solo el cristal violeta . No hay una etapa de lavado con agua después de añadir el yodo .
Decolorante - alcohol

Cualquiera de acetona o alcohol etílico se puede utilizar como el agente decolorante . El alcohol se disuelve lípidos que se encuentran en la membrana celular externa de las bacterias Gram-negativas , permitiendo que el complejo yodo - violeta cristal se escape hacia fuera de la capa de peptidoglicano más delgada . El alcohol se añade durante 10 a 20 segundos; se vierte en la diapositiva hasta que todo el yodo se elimina por lavado y la escorrentía es incoloro . En este punto en el proceso de tinción de Gram , las bacterias Gram - negativas son incoloros mientras que las bacterias Gram-positivas todavía conservan el cristal violeta . Una vez terminada la diapositiva debe ser enjuagado con agua para detener el efecto decolorante .
Contratinción - safranina

Safranina continuación, se añade para aumentar la visibilidad y el contraste con el incoloro bacterias Gram-negativas . La mancha hace que estas bacterias aparecen de color rosa bajo el microscopio . Dado que la mancha se añade a toda la muestra , sino que también tiñe las bacterias Gram - positivas , así , pero el más oscuro de la violeta de cristal esconde el encendedor safranina de color rosa . Una vez que la muestra de diapositivas se ha inundado con safranina durante un minuto , el agua se utiliza para lavar el exceso de manchas que no se adhieren a las células bacterianas.