Manchas utilizados en tinción negativa

tinción negativa en microscopía electrónica de transmisión es un procedimiento útil para visualizar estructuras muy finas en una muestra. Se utiliza generalmente para examinar macromoléculas tales como proteínas celulares , membranas celulares , virus y orgánulos celulares individuales . En este método , una mancha de metal pesado se deposita alrededor de la muestra debe ser respetado. Una tinción negativa ideal es aquel que no se une fuertemente al modelo que se produzca distorsión de características estructurales . Soluciones de acetato de uranilo

Uranly de acetato con un pH entre 4,2 y 4,5 son útiles en la tinción de diferentes tipos de muestras microbianas con buena resolución . Se prepara una solución del 1 al 3 por ciento , se filtró utilizando un filtro de 0,22 micras , y se almacenó a 4 grados Celsius en la oscuridad. Cuando se almacena de esta manera , la mancha mantiene durante al menos un año . Acetato de uranilo da buen contraste de la imagen y produce una imagen de grano fino que ayuda a visualizar partículas pequeñas con mayor claridad . Aunque esta solución también se puede utilizar con virus , no se debe utilizar con muestras que no pueden soportar condiciones ácidas .
Fosfotúngstico ácido y sus sales

una solución neutra de ácido fosfotúngstico a una concentración de 1 a 3 por ciento es útil cuando la tinción de los virus que son inestables en condiciones ácidas . Las sales de sodio y potasio de ácido fosfotúngstico se utilizan a menudo debido a que su actividad no se ve afectada por formulaciones de medios biológicos . Sin embargo, estas sales pueden dañar ciertos virus y su reacción a las lipoproteínas de la pared celular pueden causar una apariencia de fibras finas.
Molibdato de amonio

Molibdato se utiliza en la tinción de organismos que son sensibles a los cambios en la presión osmótica . Una solución neutra a una concentración entre el 1 al 2 por ciento se utiliza en la mayoría de los casos . Sin embargo , se debe tener cuidado para evitar el aumento de pH por encima de 7,0 , ya que conduce a la cristalización del molibdato de amonio que interfiere con la visualización de las muestras.
Metilamina Tungstate

ácido fosfotúngstico y sus sales de sodio y de potasio tienden a dañar ciertas estructuras frágiles de los especímenes que manchan . Este efecto puede evitarse mediante el uso de tungstato de metilamina como un agente de tinción negativa para proporcionar razonablemente buena resolución . Una solución de 2 por ciento a un pH de 6,5 se utiliza generalmente . La desventaja de usar esta mancha es que debe estar recién preparado antes de cada tinción porque degrada muy rápidamente en el almacenamiento.

Stains negativos raros

manchas tales como oxalato de uranilo , , tioglucosa oro, zirconio glicolato de sodio formiato y sulfato de aluminio y formato son manchas negativas que a veces se usan para teñir ciertas muestras con requisitos específicos.