GTE Tampón Usos

Biotecnología experimentos que involucran la extracción de ADN a partir de plásmidos requieren el uso de un tampón de llamada glucosa -tris- EDTA , abreviado como GTE . Este tampón es una solución que contiene glucosa estéril , tris (hidroximetil ) amino metano y ácido tetraacético de etileno diamina . Células bacterianas aisladas se suspendieron en tampón GTE antes de ser lisadas para cosechar el ADN plásmido que contienen. Solución GTE amortigua el medio de aislamiento , ayuda a mantener la osmolaridad y se une cationes divalentes que pueden interferir con el aislamiento process.Maintains Osmolaridad

Si las células se lisan antes de tiempo durante el proceso de aislamiento de ADN , que conduce a la degradación de la ADN y tiene un efecto adverso en el rendimiento . El contenido de glucosa en tampón GTE ayuda a mantener la osmolaridad del medio de aislamiento . Como resultado , la concentración de soluto fuera de las células plásmido imita estrechamente que dentro de las células y evita la rotura . A diferencia de otras sales con propiedades similares , la glucosa no es un electrolito y por lo tanto no causa un cambio en la capacidad amortiguadora de la solución.

Separadores Aislamiento Mediano

amortiguadores son soluciones que resisten pequeños cambios en el pH de la mezcla de reacción . En experimentos de biotecnología que implican el aislamiento de ADN de plásmidos , es importante para mantener el pH de la solución a 8,0 . Este pH es ideal para evitar que el plásmido de ADN de la degradación por hidrólisis ácida . También inhibe otras reacciones indeseables dentro de los componentes celulares que pueden interferir con la estabilidad del ADN . Tris ( hidroximetil) amino metano ayuda a mantener el nivel de pH deseado.
Liga divalentes

Ciertas enzimas nucleasas presentes en la célula tienen el potencial de degradar el ADN . Estas enzimas requieren la presencia de cationes divalentes tales como calcio , zinc y magnesio como co- factores para lograr las reacciones de degradación . El EDTA presente en el tampón GTE se une estos cationes divalentes . Esto evita la acción de las enzimas nucleasa y ayuda a obtener ADN intacto al final del proceso de aislamiento .
Uso de GTE

GTE está disponible como una solución estéril de grado biotecnología . Es un líquido incoloro con un pH de 8.0 y debe conservarse en frío. Asegúrese de que se caliente el tampón a la temperatura ambiente antes de abrir el envase. Siga la técnica aséptica al manipular este tampón para evitar el crecimiento de bacterias en el medio de aislamiento . Estudie las instrucciones de uso y seguridad del fabricante antes de utilizar esta solución.