Cómo solucionar el proceso de electroforesis

La electroforesis es un método de separación de ADN o de proteínas fragmentos por tamaño. El gel se coloca en una caja de electroforesis y se sometió a cargas opuestas . El ADN lleva una carga negativa uniforme , y por lo que migra naturalmente hacia carga positiva y lejos de cargas negativas . Los fragmentos más pequeños migrar más porque tienen un tiempo más fácil la maniobra a través de la matriz de gel . Las proteínas no tienen cargas o formas uniformes , por lo que primero deben ser sometidos a un detergente, tal como SDS , o dodecil sulfato de sodio . El detergente se desenrolla las proteínas y les da un uniforme charge.Things negativos que necesitará
Electroforesis equipos y reactivos estándar
máquina PCR reacción en cadena de la polimerasa o microbiana vector de amplificación
reactivos estándar SDS -PAGE

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Solución de problemas ADN o electroforesis de proteínas Matemáticas 1

lave bien el equipo de electroforesis . Vuelva a ejecutar el experimento . Si esto soluciona el problema , entonces el equipo o los guantes del técnico pueden haber sido contaminados con una enzima que degrada y el producto , u otra sustancia que inhibe las reacciones .
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Si el experimento falla de nuevo, ejecutar otro gel de electroforesis utilizando diferentes equipos de electroforesis . Si esto soluciona el problema , luego deseche el equipo defectuoso .
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Si el experimento todavía no funciona, entonces vuelva a ejecutar el experimento con diferentes reactivos tales como tampón , poliacrilamida , colorante y así sucesivamente . Si esto soluciona el problema , uno de los reactivos de electroforesis pudieran haber sido contaminadas o defectuosas

procedimientos específicos de ADN o proteínas
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Repita el procedimiento - . PCR , amplificación bacteriana , etc - que produjo la muestra de ADN en el primer lugar , si usted está recibiendo un gel blanco. Si vas a encontrar bandas del tamaño incorrecto , vuelva a realizar los pasos de digestión; por ejemplo, enzimas de restricción de uso para aislar el fragmento de ADN deseado; empalmar el plásmido receptor , si los hubiere y ligar los productos. Si esto produce los resultados correctos , entonces el problema era con los procedimientos que produjeron la muestra de ADN; no con el gel de electroforesis .
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repetir el experimento utilizando ADN sin cortar. Si esto produce los resultados previstos , a continuación, el problema estaba en las enzimas o procedimientos de digestión .
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Repita los procedimientos como la lisis celular , y así sucesivamente , que produjeron la muestra de proteína , en primer lugar , si usted está recibiendo un gel blanco.
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Si vas a encontrar bandas de proteína de un tamaño incorrecto , vuelva a realizar los pasos de SDS , asegurándose de calentar la muestra para permitir que el SDS se una . Si esto produce los resultados correctos , entonces el problema era con los procedimientos que produjeron la muestra , no con el gel de electroforesis .
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repetir el experimento sin el SDS . Si esto produce los resultados previstos , a continuación, el problema era con los procedimientos de SDS o asociados .