Cómo arreglar un virus al microscopio

Virología es el estudio de los virus . Los virus son tan pequeños que deben ser vistos con un microscopio electrónico . Tinción negativa debe ser utilizado para ver virus, tejidos o células con un microscopio electrónico . Que va a utilizar el mismo tipo de fijación de los protocolos de si está utilizando un microscopio electrónico de barrido o un microscopio electrónico de transmisión . El glutaraldehído es el fijador primario más comúnmente utilizado en microscopía electrónica. Un protocolo se puede utilizar para examinar un solo virus y contar la cantidad de virus present.Things que necesitará
2 tubos Eppendorf
formaldehído
glutaraldehído
agua desionizada
pipeta
tubos de pipeta
PH metros
hidróxido de sodio Página 2 por ciento de ácido fosfotúngstico acuosa
suspensión Virus
Ethanolamine
fosfato de sodio solución salina tamponada
Electron esferas de látex microscopía ( opcional)
Laboratorio -Grado agua destilada
albúmina de suero bovino
rejilla microscopio electrónico
Filtro celda de malla Laboratorio papel

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La pipetas de grado 1 laboratorio miden pequeñas cantidades de líquido con precisión.

Chill todos los productos químicos que utilizan un refrigerador de laboratorio de uso general fijado en 4 grados Celsius. Haga su fijador en un tubo Eppendorf mediante la adición de 10 por ciento de formaldehído y glutaraldehído al 5 por ciento de agua desionizada . Mezcle bien con la pipeta .
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Preparar 1N NaOH añadiendo 40,00 g de hidróxido de sodio al agua destilada de laboratorio para hacer una cantidad de 1 litro. Preparar la solución de tinción utilizando una pipeta para añadir la solución de NaOH 1N a 10 microlitros ( ul ) de ácido fosfotúngstico acuosa al 2 por ciento hasta que tenga un pH de 7,3 . Mida su pH usando un medidor de pH de calidad de laboratorio .
3 Siempre marque los tubos con un marcador permanant antes de su uso .

Añadir 100 ul de suspensión de virus a un tubo Eppendorf , midiendo con una pipeta . Fijar la suspensión de virus mediante la adición de 10 ul del 10 por ciento y 5 por ciento de formaldehído fijador de glutaraldehído .
4 esferas de látex proporcionan un punto de referencia mientras se cuentan los virus .

Combinar en un tubo Eppendorf de 10 ul de suspensión de virus , 10 ul de esferas de látex y 10 ul de agua destilada que contenía 1 por ciento de BSA, o albúmina de suero bovino. Dejar de lado las esferas de látex si no es necesario contar los virus . Pipetear la solución 30 veces , utilizando la técnica de flujo suave para evitar dañar los virus .
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Aplicar la solución a la red microscopio electrónico , y dejar actuar durante 30 segundos a un minuto. Use un pedazo de papel de filtro para extraer el exceso de líquido fuera desde el lateral. ¿Quieres una película fina y uniforme .
6 microscopios ligeros utilizan diapositivas , pero los microscopios electrónicos utilizan una cuadrícula.

Añadir 6 a 10 ul de ácido fosfotúngstico acuosa al 2 por ciento de inmediato a la red microscopio. Dejar actuar durante 30 segundos, y luego dibujarlo con un pedazo de papel de filtro . Se garantice el forma una película mientras dibuja fuera de la solución.
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Coloque la rejilla en la caja de la red, y permitir la diapositiva que se seque al aire durante varias horas o toda la noche . Sus virus ahora son capaces de ver.
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