Cómo sincronizar las células en cultivo

Para entender las bases moleculares y bioquímicos del crecimiento celular y la división, es necesario estudiar los mecanismos de regulación del ciclo celular. Estudios del ciclo celular incluyen principalmente la sincronización o coordinación de las células en una fase específica . La sincronización de la célula es un método de llevar a las células en diferentes etapas de una etapa particular de la división celular . Hay muchos métodos establecidos por los científicos en el laboratorio para sincronizar las células en fases específicas del ciclo celular . Los métodos más comunes son la privación de suero de las células durante un período de tiempo o el uso de agentes farmacológicos tales como Nocodazol . Cualquiera de estos métodos lleva a las células a parar en una fase específica del ciclo celular. Instrucciones
suero inanición Matemáticas 1

Plate sus células en medio de cultivo celular normal suplementado con un 10 por ciento de suero fetal bovino durante 12 a 14 horas, y dejar que las células se adhieren a las placas de cultivo de tejidos.
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Una vez que las células se han unido , retire el papel y enjuagar las células con 10 ml de solución tampón de fosfato .
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Escribir un medio de cultivo suplementado con un 0,2 por ciento del feto de suero bovino durante 16-48 horas . El período de tiempo depende del tipo de células que está utilizando. Algunas células requieren menos tiempo, mientras que otros requieren más tiempo . Esta etapa es el período de privación de suero .
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Después del período de tiempo fijado ha terminado , enjuague las células de nuevo con 10 ml de solución tampón de fosfato .
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Reemplace el los medios de comunicación del viejo crecimiento suplementado con 10 por ciento de suero bovino fetal. Las células están sincronizados y están listos para su experimento.
Nocodazol tratamiento
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Plate sus células en medio de cultivo celular normal suplementado con un 10 por ciento de suero bovino fetal de 12 -14 horas y deja que las células se adhieren a las placas de cultivo de tejidos.
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Saque papel y aclarar las células con 10 ml de solución tampón de fosfato .
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Añadir medios crecimiento regular suplementado con 10 por ciento de suero fetal bovino y 100 ng de nocodazol a las células durante 12 horas en 37 grados Celsius incubadora.
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Observar las células bajo el microscopio después de 12 horas de tratamiento . Las células deben estar acorralando y conseguir separarse de la placa de cultivo .
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Recoger las células tocando la placa de cultivo y con la pipeta el medio arriba y abajo varias veces. Transferir el medio que contiene las células a un tubo de polipropileno de 50 mililitros .
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Centrifugar las células a 100 xg durante 10 minutos . Eliminar el sobrenadante . Se lavan las células en 10 mililitros de solución tamponada con fosfato y se centrifuga de nuevo a 100 xg durante 10 minutos .
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Suspender las células en medio de crecimiento regular suplementado con 10 por ciento de suero fetal bovino . Las células están listas para su experimento.