Northern Blotting Técnica

técnicas de transferencia del Norte son una forma de determinar las diferencias entre la composición genética de las muestras biológicas en un laboratorio. Estas técnicas son útiles en la investigación del cáncer , la biología molecular y la identificación genética entre las especies . Estas técnicas requieren hardware especializado , pero no van más allá del nivel de habilidad de los estudiantes avanzados de secundaria. Pasos iniciales

La clave de esta técnica es la obtención de un ácido ribonucleico puro ( ARN ) de la muestra. Hay un número de maneras de lograr esto , dependiendo del tamaño de la ARN , el nivel de pureza que necesita y el equipo que tiene a la mano. Una vez que usted tiene su muestra de ARN , se mezcla con un colorante y colocarlo en una hoja de electroforesis en gel de agarosa . Pasar una corriente a través del gel . El ARN se migrar a través de la lámina de gel de una manera particular que indica sus características . Luego coloca una membrana de nylon en el gel y la parte superior con un material absorbente (por ejemplo, toallas de papel ) y el peso él. Aquí es donde el nombre de " blot " viene de . El ARN teñidos se fija en la membrana.
Radiactivo etiquetado

Para ver la posición de las diferentes piezas de ARN en la membrana , incubar la membrana con marcadores radiactivos . Etiquetas radiactivas se eligen en función de qué sección particular de ARN que se está investigando . Después del periodo de incubación, colocar la membrana en un trozo de película de rayos X; los marcadores radiactivos expondrá la película , creando una imagen de lo que es en la membrana. Una vez que se desarrolla la película, que tiene una imagen de la posición relativa de las secciones de ARN que desea examinar.

Resultados

Interpretación de los resultados de la el norte de mancha es un paso separado . Usted puede comparar su muestra de ARN a otras muestras de ARN conocidos para identificar y cuantificar el ARN que tiene. Los investigadores del cáncer a menudo comparan el ARN de las células cancerosas antes y después del tratamiento de quimioterapia para determinar los efectos de los medicamentos de quimioterapia en ciertos tipos de cáncer. La prueba de transferencia northern es relativamente barato, fácil de realizar y ofrece una gran utilidad en la investigación científica .