Cómo configurar experimentos de RMN 3D

RMN experimentos tridimensionales son una expansión de los experimentos de RMN bidimensionales , y se utilizan para asignar las resonancias de la proteína inflamatoria , C5a . Esta proteína es un componente de gran alcance de la respuesta inflamatoria del cuerpo . La respuesta inflamatoria juega un papel en ciertas enfermedades crónicas tales como la artritis reumatoide , gota , síndrome del intestino irritable y lupus . Experimentos tridimensionales permiten a los científicos estudiar los sistemas más grandes, donde la proteína está presente en formas que no pueden ser estudiados usando el método bidimensional. Experimentos tridimensionales vienen en dos categorías: los experimentos bidimensionales tras otro y experiments.Things resonancia triples que necesitará
Espectrómetro de Resonancia Magnética Nuclear con estación de trabajo
Proteína muestra de
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Coloque la muestra de proteína en el imán superconductor en el Espectrómetro de Resonancia Magnética Nuclear ( RMN ) insertándolo en la sonda de RMN. A continuación, coloque la sonda de RMN en el orificio del imán superconductor.
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Usando la estación de trabajo de equipo de Resonancia Magnética Nuclear , sintonice el Espectrómetro de Resonancia Magnética Nuclear ( RMN ) de su muestra para un experimento de dos dimensiones. Utilice " mtune " para ajustar y dar el mejor chapuzón en sus resultados.
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Lock y calzar el espectrómetro para proporcionar la mejor forma de resolución y la línea en su muestra.

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Determinar la 1H y 13C PW para la muestra y asignar sensibilidad 90 para los experimentos de dos dimensiones . Para ello, la carga en el 1D y el experimento de protones 1H y sintonizar y calzar la muestra a d1 = 10 . Escriba pw90 ? en la computadora en la estación de trabajo para obtener el valor por defecto . Para todos los experimentos de RMN , las muestras de proteínas más concentradas requieren un menor número de exploraciones .
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Inserte un tiempo de evolución indirecta adicional y una segunda mezcla para el experimento de dos dimensiones para crear un experimento en tres dimensiones . Haga esto después de la primera mezcla y antes de la adquisición de datos final . La línea de tiempo para el experimento en tres dimensiones deben ser las siguientes: preparación , evolución, tiempo de mezcla , la evolución , el tiempo y la detección de mezcla
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Repita los pasos para cada muestra de proteína que desea probar , hacer . Asegúrese de añadir en el tiempo de evolución indirecta adicional y segundo mezclando cada momento de crear el experimento en tres dimensiones .