Maneras de medir la concentración de células

Para muchas aplicaciones biológicas y clínicas , es necesario para determinar la concentración celular en una muestra . Hay varios métodos establecidos para determinar las concentraciones de células , que incluyen dilución en serie , densidad óptica y el conteo manual usando un hemocitómetro . Cualquiera de estos métodos se pueden utilizar para determinar las concentraciones de muestras biológicas o para llevar a cabo recuentos sanguíneos a partir de muestras clínicas . Cámara de recuento

una cámara de recuento puede determinar la concentración de células en una suspensión líquida . Este dispositivo también es conocido como un hemocitómetro , ya que fue diseñado originalmente para contar el número de células de la sangre en una muestra clínica . Las muestras se cargan en un pozo , colocados bajo una lente microscópica y las células se cuentan manualmente contra un fondo marcado con una rejilla en forma de V . En resumen , las células en varias plazas de la parrilla se cuentan y el tamaño total de la muestra se pueden calcular para todo el volumen.
Dilución de serie

general, los cultivos pueden contener millones de células por mililitro . En una dilución en serie , un volumen medido de suspensión de células se retira de un tubo que contiene la concentración inicial y se transfirió a otro tubo de ensayo cargada con un volumen previamente medido de líquido . Por ejemplo , eliminar un ml del tubo original y colocar en un segundo tubo que contiene nueve ml del disolvente líquido . Esto representa una dilución de diez veces . Repita este proceso hasta que un número limitado de células están disponibles para ser contados usando un hemocitómetro.
Densidad Óptica

luz disminuye a medida que pasa a través de cualquier medio, tal como una suspensión líquida que contiene las células . En base a esta característica , es posible medir las células por la densidad óptica (DO ) , o el cambio en la luz emitida y detectada . La cantidad de luz dispersada por la suspensión de células , medida en un aparato llamado un espectrofotómetro , puede ser interpretada para representar la concentración de células . Las lecturas se determinan a ciertas longitudes de onda de la luz , medida en nanómetros (nm) , y se informan , por ejemplo, como DO a 600 nm . La lectura de DO es inversamente proporcional a la concentración . En otras palabras , cuanto menor es la lectura de DO , mayor es la concentración de células .
Microscopía

Utilizando un microscopio para determinar las concentraciones de células es bastante laborioso y, a menudo inexacta . Las concentraciones de células primero tendrán que ser diluido por el método de dilución en serie se ha explicado anteriormente . Un volumen conocido de la solución celular se monta entonces sobre un portaobjetos y las células se cuentan manualmente contra una rejilla para adquirir una estimación de la muestra . Al utilizar este método , es importante mantener la muestra bien mezclada de modo que las células no se asientan en el fondo del tubo . Si esto ocurre , habrá un gran discrepancia en el número de células de la capa superior de la muestra en comparación con las capas inferiores .